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酶標儀酶免分析七大步驟
更新時(shí)間:2015-10-23 點(diǎn)擊次數:2080次
2、在標準品孔中加入50l各標準品溶液,酶標儀在各樣品孔中加入50l樣品溶液。
3、在所有孔中加入50l的抗體工作液,用蓋板膜封板,輕輕振蕩混勻,25℃環(huán)境中避光反應30分鐘。
4、小心揭開(kāi)蓋板膜,甩干孔中液體,用稀釋好的洗滌液(250μl/孔)充分洗滌微孔板3次,在吸水紙上拍干(拍干后未清除的氣泡可用未使用過(guò)的槍頭戳破)。
5、酶標儀在所有孔中加入100l的酶標二抗,酶標儀用蓋板膜封板,輕輕振蕩混勻,25℃環(huán)境中避光反應30分鐘。取出酶標板,按步驟4洗板5次。
6、洗滌程序完成后,立即用微量移液器在每個(gè)微孔中先加入50l底物液A,再加50l底物液B,輕微晃動(dòng)反應板使之*混勻,25℃環(huán)境避光顯色15分鐘(在顏色淺的情況下可適當延長(cháng)反應時(shí)間,但總顯色時(shí)間不要超過(guò)30分鐘)。
7、每孔中加入50l終止液,輕輕晃動(dòng)使之*混勻,在450nm(建議使用雙波長(cháng)450/630nm)下檢測吸光度,結果在5分鐘內讀取。